ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НА СОДЕРЖАНИЕ МАКРО- И МИКРОЭЛЕМЕНТОВ В ВОЛОСАХ ЮНОШЕЙ

РЕЗЮМЕ. Цель исследования – выявление изменений в обмене макро- и микроэлементов в волосах юношей при различных уровнях физической активности. 

Материалы и методы. Обследовано 59 юношей вузов г. Ярославля в возрасте от 18 до 22 лет (20,3±1,6), не имеющих хронических заболеваний и относящихся к группе условно здоровых лиц. Все студенты были разделены на три группы: I – высокая физическая активность (не менее 4 раз в неделю в спортивных секциях); II – средняя физическая активность (посещение тренировок 2-3 раза в неделю); III – низкая физическая активность (не привлеченные студенты к спортивной деятельности на постоянной основе). Анализ исследуемых биологических образцов волос студентов вузов г. Ярославля выполнен методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой с определением макро- и микроэлементов (ИСП-МС).

Результаты. По результатам исследований у юношей с различным уровнем физической активности выявлены значительные особенности обмена макро- и микроэлементов. В частности, у студентов-спортсменов высоких спортивных разрядов содержание кобальта, железа и марганца превышало соответствующие показатели в группах средней и низкой физической активности, а содержание меди и селена снижалось по мере увеличения нагрузки. Среди токсичных и условно токсичных элементов выявлено повышение уровня свинца и снижение ртути, относительно значений групп со средней и низкой физической активностью. При изучении макроэлементного спектра волос у юношей достоверная зависимость от уровня физической активности отмечалась лишь в отношении натрия, уровни которого более чем в 4 и 2 раза превышали таковые у лиц со средней и низкой физической активностью.

Выводы. Различная физическая активность, особенно высокая, оказывает существенное влияние на обмен макро- и микроэлементов. Анализ содержания макро- и микроэлементов в волосах юношей выявил повышенное содержание макроэлементов кальция, фосфора, калия и натрия, эссенциальных микроэлементов кобальта, железа и марганца, токсикантов свинца, лития и кадмия, а также сниженное содержание меди, селена и токсиканта ртути. Превышение нормы содержания в волосах целого ряда химических элементов свидетельствует об их усиленном «кругообороте», метаболизме, а не об их избытке. Своевременная коррекция элементного статуса позволит сохранить здоровье студентов и повысить их умственную и физическую работоспособность. 

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: макроэлементы, микроэлементы, волосы, юноши, физическая активность. 

Для цитирования: Зайцева И.П., Зайцев О.Н. Влияние различной физической активности на содержание макро- и микроэлементов в волосах юношей. Микроэлементы в медицине. 2024;25(4):60−68. DOI: 10.19112/2413-6174-2024-25-4-60-68.

ВВЕДЕНИЕ
На современном этапе развития высшего образования в эпоху развития промышленности важным требованием является сохранение здоровья студентов и предотвращение влияния неблагоприятных факторов риска. Обмен микроэлементов тесно связан с состоянием функциональных резервов организма и здоровья (Агаджанян и др., 2013), а также уровнем физической активности (Скальный и др., 2018), При дефиците или избыточном поступлении микроэлементов могут наблюдаться нарушение активности прямо или косвенно зависящих от них ферментов (Скальный, 2005) и, соответственно, снижение умственной и физической работоспособности (Зайцева, 2015), а повышенная физическая активность может приводить к перераспределению и развитию дисбаланса ряда металлов (Скальный, 2020), что формирует повышенный риск заболеваний и предпосылки для ускорения патологических процессов (Скальный и др., 2005). Воздействие токсичных микроэлементов, так же, как и избыточная кумуляция эссенциальных металлов, связана с развитием патологии органов и систем организма (Paithankar et al., 2021).

Несмотря на значительное количество работ в области спортивной физиологии, медицины, питания обеспеченности организма спортсменов макро- и микроэлементами существующие данные во многом противоречивы (Nitschke et al., 2013; Зайцева, 2015; Скальный и др., 2018).

Цель исследования – изучение изменений в обмене макро- и микроэлементов в волосах юношей при различных уровнях физической активности.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Все манипуляции проведены в соответствии с принципами Хельсинской декларации 1969 г. для исследований с привлечением человека и её более поздними обновлениями и дополнениями. Все студенты давали информированное согласие на участие в обследовании, схема которого одобрена этическим комитетом ЯрГУ им. П.Г. Демидова, протокол исследования № 1 от 20 февраля 2018 г. Все обследуемые находились в одинаковых условиях питания и режима дня.

В соответствии с главной задачей – описать состояние организма в зависимости от выполняемой недельной мускульной работы – все обследованные были разделены на 3 группы:
1) с низкой физической активностью, в которую вошли студенты, не привлеченные к спортивной деятельности на постоянной основе;
2) со средним уровнем физической активности (УФА), которая заключалась в посещении занятий физической культурой в рамках учебной программы дважды в неделю и в 2-3-разовой тренировке в неделю при занятиях борьбой самбо и фитнес-аэробикой (ФА);
3) группа с высоким УФА включала спортсменов от I взрослого разряда до мастера спорта, занимавшихся 4 раза в неделю борьбой самбо, баскетболом.

Волосы для последующего химического анализа выстригались в процедурном кабинете специализированным медицинским персоналом. Все обследуемые накануне мыли волосы с использованием привычных шампуней. Несмотря на различие в химическом составе коммерческих неспециализированных (не обогащенных отдельными минералами) шампуней (Le Blanc et al., 1999), их применение не оказывает существенного влияния на микроэлементный состав волос. С помощью предварительно обработанных этиловым спиртом ножниц из нержавеющей стали волосы с затылочной части головы выстригали в количестве примерно 0,1 г. В последующем для анализа использовали проксимальные части прядей волос. Полученные образцы хранили в конвертах из бумаги вплоть до анализа в лаборатории. 

В дальнейшем образцы волос подвергали предварительному промыванию ацетоном и дистиллированной деионизированной водой с последующим микроволновым разложением в системе Berghof SpeedWave-4 DAP-40 (Berghof Products + Instruments GmbH, 72800 Eningen, Germany) в присутствии азотной кислоты.

 Содержание токсичных и эссенциальных микроэлементов определяли методом массспектрометрии с индуктивно-связанной плазмой и технологией Dynamic Reaction Cell (ICP-DRC-MS) на спектрометре NexION 300D (PerkinElmer Inc., Shelton, CT, США), оснащенным автоматическим дозатором ESI SC-2 DX4 (Elemental Scientific Inc., Omana, NE 68122, США). Калибровку выполняли с использованием стандартных наборов реагентов Universal Data Acguisition Standards (PerkinElmer Inc.) в итоговой концентрации химических элементов в растворах 0,5; 5 и 50 мкг/мл. Дополнительно проводили внутреннюю онлайн стандартизацию с использованием стандартных растворов иттрия (Y) и родия (Rh) (PerkinElmer Inc.).

С целью проведения контроля качества лабораторных исследований использовали стандартные референтные образцы волос (GBW09101), Shanghai Institute of Nuclear Resce-arch, Shanghai, Китай).

Полученные данные о содержании химических элементов в волосах выражали в микрограммах на грамм. Для оценки частоты отклонений сравнивали полученные данные с референтными значениями содержания эссенциальных и токсичных микроэлементов в волосах (Скальный, 2003; Skalny et al., 2015a, b).

Статистическую обработку полученных данных проводили при помощи программных пакетов Microsoft Excel XP (Microsoft Corp., США) и Statistica 10.0 (Stat Soft Inc., США). Ввиду того, что распределение значений изучаемых признаков в выборке оказалось отличным от нормального, в работе в качестве описательных характеристик помимо средних значений использовали медианы (q25 и q75). При сравнении трех групп производили оценку достоверности различий с помощью теста Краскела−Уоллиса.

РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ содержания эссенциальных микроэлементов у юношей с различным уровнем физической активности выявил выраженные различия между группами (табл. 1 "Содержание эссенциальных микроэлементов в волосах студентов с различным уровнем физической активности" в приложенном pdf-файле).  

У юношей с высокой физической активностью содержание кобальта в волосах превышало соответствующие значения, полученные в группах со средней и низкой физической активностью, на 49 и 114%, соответственно. При этом достоверными различия являлись лишь в последнем случае. Несмотря на наличие межгрупповых различий, общая тенденция к увеличению уровня кобальта в волосах, ассоциированному с физической активностью, лишь приближалась к достоверной. Содержание меди в волосах юношей достоверно снижалось по мере увеличения физической активности. При этом уровень данного металла у лиц с высоким уровнем физической активности был достоверно ниже такового у обследуемых со средней и низкой физической активностью на 29 и 16%, соответственно.

Напротив, концентрация железа у студентов-спортсменов высоких спортивных разрядов превышала соответствующие показатели в группах средней и низкой физической активности на 42 и 75% соответственно. При этом общая тенденция к увеличению концентрации железа в волосах по мере повышения уровня физической активности характеризовалась высокой степенью достоверности в соответствии с результатами теста Краскела–Уоллиса.

Уровень марганца в волосах обследуемых студентов также характеризовался достоверной положительной зависимостью от физической активности. При этом содержание данного микроэлемента в волосах лиц с высоким уровнем физической активности превышало значения, полученные в группах со средней и низкой физической активностью, более чем в 3 и 2 раза соответственно.

Концентрация селена у юношей характеризовалась достоверной зависимостью от уровня физической активности. Так, в группе спортсменов высоких спортивных разрядов было выявлено 24% и 17%-ное снижение данного показателя относительно соответствующих значений у лиц со средней и низкой физической активностью, что косвенно свидетельствует о гормональной специфике вовлеченности селенопротеидов в адаптивные перестройки метаболизма.

В тоже время анализ данных не выявил сколько-нибудь значимых различий в погрупповых показателях хрома, йода, ванадия и цинка у юношей с различным уровнем физической активности.

В ходе исследования установлено, что содержание токсичных и потенциально токсичных микроэлементов в волосах юношей изменяется в ответ на действие различного уровня физической активности (табл. 2 "Содержание токсичных и потенциально токсичных микроэлементов в волосах юношей с различным уровнем физической активности" в приложенном pdf-файле). 

Уровень кадмия в группе студентов, активно занимающихся спортом и имеющих высокие спортивные разряды, превышал значения в группах со средним и низким уровнем физической активности более чем в 3 и 2 раза соответственно. Более того, общая тенденция к увеличению уровня кадмия у лиц с повышенной физической активностью также являлась достоверной в соответствии с результатами теста Краскела–Уоллиса. При этом содержание ртути в волосах студентов с высокой физической активностью было практически в 2 раза снижено по сравнению с соответствующими показателями других групп. 

Концентрация лития в волосах студентов с высоким уровнем физической активности достоверно превышала соответствующие показатели в группе контроля в 2 раза. В то же время, несмотря на некоторое увеличение уровня данного металла у юношей со средним уровнем физической активности, достоверных различий погрупповых данных выявлено не было. Использование теста Краскела–Уоллиса позволило установить статистическую значимость наблюдаемой тенденции

Положительная зависимость от уровня физической активности юношей в условиях действия образовательной среды также выявлена для свинца. При этом концентрация металла в волосах спортсменов высоких спортивных разрядов превышала таковые для групп со средней и низкой физической активности более чем в 3 и 2 раза соответственно.

В то же время уровень физической активности не оказывал достоверного влияния на содержание алюминия, мышьяка, висмута, никеля и олова в волосах студентов.

При изучении макроэлементного спектра волос у юношей (табл. 3 "Содержание макроэлементов в волосах студентов с различным уровнем физической активности" в приложенном pdf-файле) установлено, что концентрация кальция в волосах студентов, регулярно занимающихся спортом с соответствующим воздействием высоких физических нагрузок, достоверно превышала показатели группы контроля на 41%. В то же время общая зависимость уровня кальция в волосах от уровня физической активности не являлась достоверной, хотя и приближалась к таковой по степени значимости.

Аналогично, несмотря на более чем двукратное и троекратное превышение уровня калия у студентов-спортсменов высоких спортивных разрядов над соответствующими значениями у лиц со средним и низким уровнем активности, общая тенденция также не являлась статистически значимой.

Следует отметить, что достоверная зависимость от уровня физической активности отмечалась лишь в отношении натрия. При этом концентрации данного макроэлемента в волосах студентов-спортсменов с высоким уровнем физической активности превышали таковые у лиц со средней и низкой активностью более чем в 4 и 2 раза соответственно.

Несмотря на слабое 11%-ное различие между группами с низкой и высокой физической активностью в концентрации фосфора в волосах юношей, значимость тенденции к увеличению уровня фосфора по мере повышения уровня физической активности приближалась к достоверной. Следует отметить, что содержание в волосах студентов магния не характеризовалось выраженными межгрупповыми различиями в зависимости от уровня физической активности.

Наблюдаемое снижение уровня меди в биоиндикаторных субстратах связано с торможением всасывания железа, нарушением гемоглобинообразования, угнетением кроветворения, развитием микроцитарной гипохромной анемии, ухудшением деятельности сердечно-сосудистой системы (Троегубова и др., 2014). Лидирующую позицию среди дефицитарных элементов у спортсменов с анемией занимает дефицит железа, сопровождающийся, как правило, дефицитом цинка и меди (Луговая и др., 2011; de Oliveira Kde J et. al., 2009). Антагонистические взаимоотношения между медью и цинком неоднократно продемонстрированы в клинических и экспериментальных исследованиях (Osredkar, Sustar, 2011). Показана связь между высокой частотой дефицита меди в популяции (взрослые) и распространением остеопороза (r = 0.51; p <0,5) (Скальная и др., 2015; Афтанас и др., 2013). Низкий уровень меди в волосах на популяционном уровне отражает в определенной степени низкую обеспеченность этим элементом рационов питания, тем самым повышая риск смертности и, соответственно сокращение продолжительности жизни взрослых (Зайцева и др., 2019). Повышенная потребность организма в меди может быть связана с ее биологическими функциями, такими как участие в тканевом дыхании, антиоксидантной защите, транспорте и всасывании железа (Скальный и др., 2018). Повышенное содержание перечисленных химических элементов в волосах, как правило, совпадает с увеличением их уровня в сыворотке крови и цельной крови (свинец) (Скальный, 2009; Grabeklis et al., 2011; Зайцева и др., 2016). Превышение нормы содержания в волосах целого ряда химических элементов, характерное для представителей мужского пола (Скальный, 2005), может быть отражением выраженной мускулизации юношей-спортсменов (Зайцева, 2019) и скорее свидетельствует об их усиленном «кругообороте», метаболизме у спортсменов (Pasalic et al., 2015), а не об их избытке (Зайцева и др., 2019). Косвенным подтверждением этому может служить исследование, в котором показано, что под влиянием токсической нагрузки повышение уровня макроэлементов в волосах может отражать их увеличенный отток из организма (Grabeklis et al., 2011).

Выраженное снижение селена в биоиндикаторных субстратах обследуемых с высокой физической активностью может быть следствием его участия в функционировании антиоксидантных систем в условиях развития окислительного стресса (Pfister et al., 2016), работа которых подвержена напряжению в процессе адаптации к повышенным физическим нагрузкам. Недостаток в организме спортсмена селена ведет к нарушению целостности клеточных мембран, значительному снижению активности сгруппированных на них ферментов, накоплению кальция внутри клеток, нарушению метаболизма аминокислот и кетоновых кислот, снижению энергопродуцирующих процессов (McCormick F. Et al., 2012). При дефиците селена в рационе питания в организме лиц, подверженных повышением психоэмоциональным и физическим нагрузкам, могут возникать следующие изменения: снижение иммунитета, повышение склонности к воспалительным заболеваниям; замедления роста и др. (Троегубова и др., 2014).

Важным моментом является выраженное влияние дефицита меди и селена на антиоксидантную систему организма, работа которой подвержена напряжению в процессе адаптации к повышенным физическим нагрузкам (Cu, Zn-супероксиддисмутаза, церуплазмин, глутатион пероксидаза), и синтез соединительной ткани (Оберлис и др., 2008; Зайцева и др., 2019).

Интересным также представляется повышение уровня кадмия, лития и свинца в волосах лиц, занимающихся спортом, на фоне одновременного снижения концентрации ртути. С одной стороны, это может свидетельствовать об активации выведения из организма токсичных металлов вследствие интенсификации обменных процессов при повышенном уровне физической активности и, соответственно, рассматриваться как позитивный момент спортивной деятельности. С другой стороны, повышенное содержание токсичных металлов в волосах является следствием избыточного поступления и содержания в биологических средах токсических металлов у студентов-спортсменов и, следовательно, повышением вероятности реализации их негативного эффекта на различные стороны метаболизма с последующим нарушением состояния здоровья, качества жизни, физической и умственной работоспособности. Снижению ртути может способствовать интенсификация экскреции с потом в условиях обильного потоотделения при физической нагрузке (Sears et al., 2012; Скальный и др., 2018), повышение мобилизации токсичных металлов из депо (костная, нервная ткань) и их последующая экскреция, а также способность лимитировать физические резервы организма путем реализации универсальных механизмов токсичности (таких как окислительный стресс, воспаление (Jomova, Valko, 2011) и в некоторых случаях эндоплазматический стресс (Kitamura, 2010). Лимитирование воздействия токсичных металлов и металлоидов на организм спортсменов является важной задачей (Зайцева, 2019). Следует отметить, что повышение физической активности, как правило, сопровождается снижением уровня токсичности микроэлементов в организме (Скальный, 2020).

Только выраженное увеличение физической нагрузки может существенно повлиять на показатели минерального обмена, в то время как физическая нагрузка средней интенсивности является естественной для организма, который к ней легко адаптируется без дополнительных внешних воздействий. Показана более высокая скорость катаболизма макро- и микроэлементов у спортсменов по сравнению с контролем, которая проявляется в виде их повышенного содержания в волосах.

ВЫВОДЫ
Проведенные исследования позволили выявить разнонаправленность изменения уровня различных макро-и микроэлементов в организме студентов в зависимости от различной физической активности. Для осуществления коррекции последствий дисбиоэлементозов на занятиях спортом и различной двигательной активности требуется дальнейшее проведение исследований для формирования комплексного понимания физиологических особенностей организма не только студентов, но и всех спортсменов, и разработать единственно правильный и эффективный подход к коррекции. Поддержание элементного статуса организма обучающихся является залогом сохранения здоровья, высокой работоспособности и успехов как в спорте, так и в учебе.

ЛИТЕРАТУРА
Агаджанян Н.А., Скальный А.В., Детков В.Ю. Элементный портрет человека: заболеваемость, демография и проблема управления здоровьем нации. Экология человека. 2013; 11: 3–12.
Афтанас Л.И., Березкина Е.С., Бонитенко Е.Ю. и др. Элементный статус населения России. Ч. 4: Элементный статус населения Приволжского и Уральского федеральных округов. СПб.: Медкнига «ЭЛБИ-СПб», 2013. 575 с.
Зайцева И.П. Влияние физической нагрузки на содержание макро- и микроэлементов в волосах девушек. Микроэлементы в медицине. 2015; 16(1): 36–40.
Зайцева И.П., Агаджанян Н.А., Скальный А.В. и др. Влияние профессиональной физической нагрузки различного уровня у девушек-спортсменок на содержание макро- и микроэлементов в различных биоиндикаторных средах. Теория и практика физической культуры. 2016; 6: 45.
Зайцева И.П., Зайцев О.Н. Изучение влияния профессиональной физической нагрузки на содержание химических элементов в волосах спортсменов (борцов). Физиология человека. 2019; 45(1): 81–87.
Луговая Е.А., Бабаниязов Х.Х. Влияние ацизола и кобазола на элементный статус организма жителей Магадана, занимающихся спортом. Вестник ОГУ. 2011; 15: 82–85.
Оберлиз Д., Харланд Б., Скальный А.В. Биологическая роль макро- и микроэлементов у человека и животных. СПб.: Наука, 2008. 544 с.
Скальный А.В., Зайцева И.П., Тиньков А.А. Микроэлементы и спорт. Персонализированная коррекция элементного статуса спортсменов. М., 2018. 288 с.
Скальный А.В. Физиологические аспекты применения макро- и микроэлементов в спорте. Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ. 2005. 210 с.
Скальный А.В. Физиологические аспекты применения макро- и микроэлементов в спорте. Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ. 2005. 210 с.
Скальный А.В., Орджоникидзе З.Г., Катулин А.Н. Питание в спорте: макро- и микроэлементы. М.: ОАО «Издательский дом Городец». 2005. 144 с.
Скальный А.В. Референтные значения концентрации химических элементов в волосах, полученных методом ИСПАЭС (АНО «Центр Биотической медицины»). Микроэлементы в медицине. 2003; 4(1): 55–56.
Скальный А.В., Лакарова Е.В., Кузнецов В.В., Скальная М.Г. Аналитические методы в биоэлементологии. СПб.: Наука, 2009. 264 с.
Скальная М.Г., Скальный А.В. Микроэлементы: биологическая роль и значение для медицинской практики. Сообщение 1. Медь. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2015; 1: 15–31.
Троегубова Н.А., Рылова Н.В., Самойлов А.С. Микроэлементы в питании спортсменов. Практическая медицина. 2014; 1(77): 46–49.
de Oliveira Kde J., Donangelo C.M., de Oliveira A.V. Jr, da Silveira C.L., Koury J.C. Effect of zinc supplementation on the antioxidant, copper, and iron status of physically active adolescents. Cell Biochem Funct. 2009; 27(3): 162–166.
Grabeklis A.R., Skalny A.V., Nechiporenko S.P., Lakarova E.V. Indicator ability of biosubstances in monitoring the moderate occupational exposure to toxic metals. J. Trace Elem. Med. Biol. 2011; 25(Suppl 1): S41.
Jomova K, Valko M. Advances in metal-induced oxidative stress and human disease. Toxicol. Science and Education Publishing. 2011; 283(2-3): 65.
Kitamura M., Hiramatsu N. The oxidative stress: endoplasmic reticulum stress axis in cadmium toxicity. Biometals. 2010; 23(5): 941.
LeBlanc A., Dumas P., Lefebvre L. Trace element content of commercial shampoos: impact on trace element levels in hair. Science of the total environment. 1999; 229(1-2): 121–124.
McCormick F., Nwachukwu B.U., Provencher M.T. Stress fractures in runners. Clin Sports Med. 2012; 31(2): 291–306.
Nitschke W., Russell M.J. Beating the acetyl coenzyme-A pathway to the origin of life. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2013; 368. DOI:10.1098/rstb.2012.0258.
Osredkar J., Sustar N. Copper and zinc, biological role and significance of copper/zinc imbalance. J Clinic Toxicol S, 2011; 3(2161): 0495.
Paithankar J.G., Saini S., Dwivedi S., Sharma A., Chowdhuri D.K. Heavy metal associated health hazards: An interplay of oxidative stress and signal transduction. Chemosphere. 2021; 262: 128350. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2020.128350.
Pfister C., Dawzcynski H., Schingale F.J. (). Sodium selenite and cancer related lymphedema: Biological and pharmacological effects. Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 2016; 37: 111–116.
Paithankar J.G., Saini S., Dwivedi S., Sharma A., Chowdhuri D.K. Heavy metal associated health hazards: An interplay of oxidative stress and signal transduction. Chemosphere. 2021; 262: 128350. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2020.128350.
Skalny A.V., Skalnaya M.G., Tinkov A.A., Serebryansky E.P. et al. Reference values of hair toxic trace elements content in occupationally non-exposed Russian population. Environmental toxicology and pharmacology. 2015b; 40(1): 18–21.
Skalny A.V., Skalnaya M.G., Tinkov A.A., Serebryansky E.P. et al. Hair concentration of essential trace elements in adult non-exposed Russian population. Environmental monitoring and assessment. 2015a; 187(11): 677.
Skalny A.V., Ordzhonikidze Z.G., Katulin A.N. Nutrition in sports: macro- and microelements. Moscow: JSC Publishing House Gorodets. 2005. 144 p.
Skalny A.V. Reference values of the concentration of chemical elements in hair obtained by the ISP-NPP method (ANO "Center for Biotic Medicine"). Trace elements in medicine. 2003; 4(1): 55–56.
Skalny A.V., Lakarova E.V., Kuznetsov V.V., Skalnaya M.G. Analytical methods in bioelementology. St. Petersburg: Nauka, 2009. 264 p.
Skalny A.V., Lakarova E.V., Kuznetsov V.V., Skalnaya M.G. Analytical methods in bioelementology. St. Petersburg: Nauka, 2009. 264 p.